ANA报告解读及核型判读

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检测背景

抗核抗体（antinuclear antibodies，ANA）作为自身免疫病（autoimmune dieases，AID）重要的生物学标志，是临床应用中最广泛、最基础的一组自身抗体。传统意义上，ANA指的是抗细胞核抗原成分的自身抗体总称，因为细胞核是ANA靶抗原所在的最重要的结构部位。随着检测技术的进步，ANA针对的靶抗原成分已有细胞核扩展到整个细胞成分，包括细胞核、细胞浆、细胞骨架及细胞分裂周期蛋白。目前ANA定义是以真核细胞的各种成分为靶抗原的自身抗体总称。

ANA作为AID重要的生物学标志，常见于系统性红斑狼疮（SLE）、干燥综合征（SS）、系统性硬化症（SSc）、混合性结缔组织病（MCTD）及自身免疫性炎性肌炎（IIM）等系统性（非器官特异性）AID 患者中，同时ANA亦可见于器官特异性AID 患者，如自身免疫性肝病、自身免疫性甲状腺炎等。除此之外，ANA也可见于慢性感染性疾病、肿瘤及健康人群（阳性率高达11.27%）中。检测ANA对AID的诊断、鉴别诊断、分型及疾病活动性监测等具有重要的临床意义。

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02

检测方法

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间接免疫荧光法（IIFT）仍然是ANA检测首选方法

——自身抗体筛查实验公认的金标准

其它检测方法可作为间接免疫荧光法的补充，提高检验结果的可靠性。但是当患者临床表现高度怀疑罹患某种自身免疫病（例如：SLE，SS、PM/DM等）时，即使IIFT-ANA阴性，也应该考虑进行ANA特异性自身抗体的检测。因此，对于临床疑似自身免疫病的患者，应同时进行ANA筛查+确认检测。

由于检测方法敏感性差异及靶抗原特点，IIFT检测ANA阴性而特异性抗体阳性现象的发生率在临床上约为5-10%。

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03

抗核抗体（ANA）报告单解读

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核型——荧光模式：预测靶抗原范围，预测可能的疾病、症状、预后等；

滴度——荧光滴度：高滴度标志了自身免疫性疾病的可能性。

检测方法的局限性：报告解读主观性强，判断方法标准不一，给临床诊疗带来不便

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为了推进各医院检验报告互认，专家们对核型的解读进行了标准化——ICAP，ICAP定义了每种荧光模型，并对鉴定要点进行了详细阐述。

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核型判读

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*Hep2细胞具有许多特点,其中最为突出的是它们的免疫原性。这些细胞表达了许多人类抗原,包括核糖体蛋白、核酸、磷脂等。因此,Hep2细胞被广泛用于自身免疫性疾病的研究中。

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本文将对基础级核型进行判读识别

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核型：AC-1-均质型

细胞核呈现均匀荧光，根据细胞基质的不同，部分核仁有荧光。分裂期细胞（中期，后期和末期）染色质浓缩成为染色体呈均匀、透明的荧光，且亮度更强。

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核型：AC-2-致密细颗粒型

间期细胞核呈现大小不一、荧光强度不同、分布不均的颗粒，且这些颗粒在某些区域排列密集，而在其他的区域则较为稀疏 (典型的特征)。分裂中期板区呈现强颗粒荧光，并有明显的粗颗粒核型。

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核型：AC-3-着丝点型

间期细胞呈现离散型的粗荧光颗粒（40-80/细胞），分裂期细胞的中间位置出现带状的浓缩点状荧光。

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核型：AC-4-细颗粒型

细胞核呈现细颗粒样荧光，部分核仁阳性，分裂期细胞 (中期，后期和末期) 浓缩染色体阴性。例如抗SS-A/Ro， 抗SS-B/La。

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核型：AC-5-粗颗粒型

细胞核呈粗颗粒样荧光，核仁部分阳性。分裂期细胞（中期，后期和末期）浓缩染色体阴性。如：抗-Sm抗体，抗-U1RNP抗体。

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核型：AC-6-核多点型

出现清晰可数的点状荧光（通常6-20个），例如SP-100。

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核型：AC-7-核少点型

出现清晰可数的点状荧光（大多有1-6个核点），也称为螺旋小体和卡哈尔体。例如抗p80螺旋蛋白。

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核型：AC-8-核仁均质型

核仁呈现弥散荧光，有丝分裂中期板阴性。例如抗-PM-Scl，抗-Th/To。

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核型：AC-9-核仁斑片型

核仁和卡哈尔体呈不规则荧光，分裂期细胞表现为染色体周围的环状荧光。如：抗纤维蛋白抗体。

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核型：AC-10-核仁颗粒型

间期细胞核仁产生密集、清晰的颗粒状荧光，分裂中期细胞胞浆内最多可见5对明亮的核仁组成体（NOR），分裂期细胞胞浆可呈现微弱荧光。例如抗NOR-90抗体，抗RNA聚合酶I抗体。

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核型：AC-11-光滑核膜型  

细胞核呈现均匀荧光，核周增强；分裂中期和后期细胞的染色体阴性；临近细胞相触部位荧光增强。例如抗板层素B抗体。

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核型：AC-12-点状核膜型

间期细胞核膜呈现颗粒状荧光，临近细胞相触部位的荧光增强。分裂中期和后期细胞的染色体阴性。例如抗gp210抗体。

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核型：AC-13-PCNA型样

呈现形态多样的颗粒状荧光，且颗粒大小和亮度不一；在G1期，部分间期细胞阴性，但在S期则有较强的荧光。此外，在S晚期和G2早期的细胞可呈现零星颗粒荧光，核仁偶有荧光，分裂期细胞阴性。

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核型：AC-14-着丝点F样型

核斑点染色程度有显著差异，G2期染色最强，G1期最弱或无染色。着丝粒体在前中期和分裂中期细胞内呈阳性，展现出多颗排列整齐但小而微弱的色点。前中期细胞多数呈现微弱的核被膜染色。有些血清样本在分裂后期和末期的子细胞分裂中区环 (即中间体，茎体) 则有强烈染色。分裂期细胞的细胞质有广泛染色。

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核型：AC-15-胞浆线性/肌动蛋白型

核斑点染色程度有显著差异，G2期染色最强，G1期最弱或无染色。着丝粒体在前中期和分裂中期细胞内呈阳性，展现出多颗排列整齐但小而微弱的色点。前中期细胞多数呈现微弱的核被膜染色。有些血清样本在分裂后期和末期的子细胞分裂中区环 (即中间体，茎体) 则有强烈染色。分裂期细胞的细胞质有广泛染色。

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核型：AC-16-胞浆丝性/微管型

微管和中间纤维的染色由核边缘扩散出来，例如抗细胞角蛋白抗体，抗波形蛋白抗体，抗原肌球蛋白抗体。

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核型：AC-17-胞浆节段型

微管和中间纤维的染色分裂间期细胞胞浆边缘呈现增强的短节状荧光，例如抗α-辅肌动蛋白抗体，抗黏着斑蛋白抗体。

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核型：AC-18-胞浆散点型

微管和中间纤维的染色分裂间期细胞GW小体在间期细胞的胞浆中有染色，常见于S/G2晚期细胞。例如抗GW182抗体，抗anti-Su/Ago2抗体。

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核型：AC-19-胞浆致密颗粒型

整个细胞质呈现接近均匀但浑沌不淸的模式。例如抗PL-7抗体。

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核型：AC-20-胞浆细颗粒型

细胞胞浆中呈现散在细小颗粒的染色，多具均匀或致密细颗粒的背景。例如抗Jo-1抗体。

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核型：AC-21-胞浆网状/线粒体样型

分裂间期细胞胞浆内呈现粗颗粒样荧光。

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核型：AC-22-胞浆极性/高尔基体样型

在细胞浆两级，靠近细胞核的一侧呈现不连续斑点或颗粒样染色。

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核型：AC-23-胞浆棒环状型

间期细胞胞质内有明显的杆状和环状结构。也有报道指细胞核中出现较小的杆或环状染色。

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